MTD 243-670 Uživatelský manuál Strana 9

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2 Zusammenfassung
Im natürlichen Lebensraum von Methanococcus voltae kommt Selen in
unterschiedlichen Verbindungen und Konzentration vor. So variiert der Selengehalt
im Mündungswasser verschiedener Flüsse zwischen 0,1 und 63 nM. Aufgrund der
guten Löslichkeit sind die Oxianionen des Selens biologisch am interessantesten. Sie
sind daher aber auch in hohen Konzentrationen toxisch. Selen in geringen Mengen
ist dagegen essentiell, da es als Selenomethionin oder -cystein in Proteinen
vorkommen kann. Eine häufig anzutreffende organische Selenverbindungen ist das
Dimethylselenid (DMSe). Diese flüchtige Substanz wird von einer Vielzahl
Organismen zur Detoxifizierung gebildet.
Aus M. voltae sind insgesamt 4 Hydrogenasen bekannt, wovon zwei ein
Selenocystein aufweisen und konstitutiv exprimiert werden. Die Induktion der
Transkription der selenfreien Isoenzyme erfolgt dagegen bei Selenmangel. In
Expressionsanalysen zeigte sich, dass 5 weitere Proteine ebenfalls nur unter
Selenlimitierung synthetisiert werden. Von zweien wurde jeweils die N-terminale
Peptidsequenz und von einem zusätzlich interne Peptidsequenzen bestimmt.
In der vorliegenden Arbeit wurde zunächst das Gen eines dieser Proteine
identifiziert. In einer Datenbanksuche stellte sich dann heraus, dass es
Sequenzidentitäten mit Corrinoid-Proteinen aus Methanosarcina aufwies. Es wurde
als SdmA bezeichnet (für Dimethyl
s
elenid Demethylierung). Das Gen sdmA liegt
zusammen mit sdmB und sdmC auf einem gemeinsamen polycistronischen
Messenger, der nur bei Selenmangel nachweisbar war. SdmB und SdmC haben
gemeinsame Sequenzmotive mit Methyltransferasen, die in einigen
Methanoarchaeen an der methylotrophen Methanogenese beteiligt sind. Dabei
übertragen diese die Methylgruppe von Corrinoid-Proteinen auf den Akzeptor
Coenzym M. Die Methylgruppe stammt dabei beispielsweise aus methylierten
Aminen bzw. Thiolen oder aus Methanol.
Normalerweise werden von M. voltae für die Methanogenese nur Formiat oder
H
2
/CO
2
erschlossen, so bestätigte sich die Vermutung nicht, dass bei Selenmangel
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